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我們在細胞培養的過程中，為了減少細胞代謝從而達到長期儲存的目的，就會利用凍存管進行細胞凍存，那么我們在后續使用到細胞的時候就需要進行細胞復蘇了，今天富道細胞就跟大家簡單分享一下凍存管復蘇細胞的流程，其中分為玻璃化凍存和非玻璃化凍存的兩種復蘇方式：

一、非玻璃化凍存的復蘇方法

1.調配370C～400C的溫水，或將恒溫水浴箱的溫度調節至370C～400C；

2.從液氮中取出凍存管，立即投入370C～400C溫水中迅速晃動，直至凍存液完全溶解；

3.將細胞凍存懸液轉移到離心管內，加入約5ml培養液，輕輕吹打混勻；

4.將細胞懸液經800～1000r/min離心5min，棄上清夜；

5.向細胞沉淀內加入完全培養液，輕輕吹打混勻，將細胞懸液轉移到培養瓶內，補足培養液進行培養。

二、玻璃化凍存的復蘇方法

1.將凍存管從液氮中取出，立即投入冰浴中5min。復溫速率約5600C/min。一次可以進行多個凍存管的復蘇；

2.將凍存管兩端剪斷，可以將5ml細胞凍存懸液轉移到50ml離心管中；

3.沿離心管壁緩慢加入已在冰浴中預冷的含20％胎牛血清的Hanks平衡鹽溶液。前10min以0.2ml/min的速度加入，后10min以0.5ml/min的速度加入，接著的15min以0.75ml/min的速度加入，最后30min以1ml/min的速度加入。全過程約為65min，都在冰浴中進行；

4.將稀釋后的細胞懸液以400r/min離心5min，去除上清。向細胞沉淀中加入培養液重新懸浮細胞，用于培養。