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我們在使用細胞轉瓶時都是將其固定在支加上，傾斜度為5°～10°左右，或將轉瓶放在一排排轉軸之間，使轉瓶隨著轉軸以每小時6～12 轉緩慢轉動。

細胞貼附于細胞轉瓶壁四周，細胞貼壁和生長只有一個表面面積，經轉動一方面使培養液流動，利于細胞吸收營養和進行代謝，一方面使細胞有機會接觸氣體，有利于細胞呼吸和發生氧化還原作用，有利于細胞生長繁殖。

細胞轉瓶內保持有相當大的上方空間，以維持合適的氧和pH 水平，通過轉動可使細胞交替接觸培養液和空氣，營養可被充分利用。若需增加細胞產量，除可在增加轉瓶的數量和容積外，使瓶直徑盡可能小，此時表面面積可因直徑或長度的倍增而成倍增加。

轉瓶培養也可使用灌注培養系統，因此系統需要錯綜復雜回旋的可連續供應的管道進入瓶內，這是一種昂貴的選擇。

我們在使用細胞轉瓶時可按照以下操作步驟：加入適量生產培養液于轉瓶中。加入所培養的細胞。在37℃下，以12轉/小時，轉動2小時，使細胞均勻貼壁。減少轉動速度至5 轉/小時并連續培養。在倒置顯微鏡下使用長焦距物鏡檢查細胞。在細胞生長至明顯匯合時(5～6天)，移出培養液，加入0.25%胰蛋白酶，并滾動轉瓶以收獲細胞。洗去胰蛋白酶，加入新鮮培養基，可轉入擴大再培養。為了增加表面積，有人將轉瓶表面制成帶皺紋的表面或插入多層隔板。以增加表面積。當然這是其中一種的培養方式，我們科研者在使用細胞轉瓶來培養細胞時也需要根據自身培養細胞來調整。