国产精品激情五月综合_精品少妇人妻av无码喷水_69堂一区二区三区四区_欧美日韩综合无码中文字幕_精品少妇人妻中文在线_国产大片无码在线_国产精品无码av在线观看播放_无码第一区在线高清观看_69AV午夜_久久久国产99久久国产久。

我們在使用凍存管進行凍存細胞時不能直接在不加任何條件下凍存細胞，因為不管是細胞還是環境中的水分都會形成冰晶從而影響細胞死亡，所以需要加入保護液，使冰點降低，在后續凍結的過程中能有效的保護細胞因為冰晶的產生而造成死亡。明白了使用凍存管凍存細胞的大概方法之后，接下來跟大家詳細說明一下：

1、消化細胞，將細胞懸液收集至離心管中。

2、1000rpm離心10分鐘，棄上清液。

3、沉淀加含保護液的培養，計數，調整至5×106/ml左右。

4、將懸液分至凍存管中，每管1ml。

5、將凍存管口封嚴。如用安瓿瓶則火焰封口，封口一定要嚴，否則復蘇時易出現爆裂。

6、貼上標簽，寫明細胞種類，凍存日期。凍存管外拴一金屬重物和一細繩。

7、按下列順序降溫：室溫→4℃（20分鐘）→冰箱冷凍室（30分鐘）→低溫冰箱（－30℃ 1小時）→氣態氮（30分鐘）→液氮。

注意：操作時應小心，以免液氮凍傷。液氮定期檢查，隨時補充，絕對不能揮發干凈，一般30立升的液氮能用1～1.5月。