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細胞培養瓶內細胞的消化步驟
發表日期:2023-01-04

細胞培養瓶多用于貼壁細胞的培養,當細胞生長到一定程度后,需要將其消化下來,進行下一步的傳代或其他操作。由于是貼壁細胞,因此消化細胞時需要借助消化酶讓細胞從瓶壁脫落,具體的操作步驟如下:

1、吸去培養液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。

2、加入少量胰酶細胞消化液,略蓋過細胞即可,根據胰酶效率差異可以增加惑減少胰酶用量。室溫放置30秒至2分鐘(不同的細胞消化時間有所不同)。

細胞培養瓶內細胞的消化步驟_富道細胞

3、顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察細胞培養瓶底部發現細胞的形態發生明顯的變化呈白茫狀;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來。

4、此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗如果發現消化不足,則加入胰酶細胞消化液重新消化。

以上是細胞培養瓶內細胞的消化步驟,在操作的時候我們要注意控制好消化時間,避免因為消化時間不足,未達到相應的消化效果;或因為消化過度,對細胞造成損傷,影響后期的細胞培養。

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