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細(xì)胞搖瓶是一種三角形的細(xì)胞培養(yǎng)容器，多用于培養(yǎng)各種懸浮細(xì)胞或儲(chǔ)存、制備培養(yǎng)基。在細(xì)胞生長(zhǎng)到一定程度后，我們需要對(duì)其進(jìn)行傳代操作，那么，具體該如何操作呢？

由于細(xì)胞已經(jīng)在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中懸浮，所以無(wú)需酶的作用使其從培養(yǎng)容器表面脫離，方法簡(jiǎn)單。首先準(zhǔn)備裝有懸浮細(xì)胞的三角搖瓶；將完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基預(yù)熱至37℃；37℃ 培養(yǎng)箱充有二氧化碳濃度為 5% 的濕化空氣。懸浮細(xì)胞傳代有兩種方式：

一、直接傳代法

1、待懸浮細(xì)胞長(zhǎng)滿至 80%～90%（細(xì)胞懸液變黃），即可傳代；

2、用吸管吸棄細(xì)胞懸液 1 / 2～1 / 3；

3、加入適量的新鮮培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)。

二、離心傳代法（在發(fā)現(xiàn)有細(xì)胞碎片的情況下）

1、將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)；

2、150 g 離心 5 min，棄去上層清液；

3、使用新鮮的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞；

4、吸管吸取適量細(xì)胞懸液，裝入新的細(xì)胞搖瓶，再加入適量的新鮮培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)。

以上是細(xì)胞搖瓶中懸浮細(xì)胞的傳代操作，在操作的時(shí)候我們要嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作，避免引入外源污染，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。