傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分,重新接種到另外的培養器皿(瓶)內,再進行培養的過程。在懸浮細胞傳代中,細胞搖瓶是不可或缺的一種細胞培養耗材。
細胞生長不依賴支持物表面,在培養液中呈懸浮狀態生長,這類細胞稱為懸浮細胞,如淋巴細胞。懸浮細胞傳代步驟如下:
1.先將裝有細胞的細胞搖瓶從培養箱拿出,用酒精噴灑瓶身后將細胞搖瓶拿進超凈臺;
2. 打開瓶蓋,用200 ul移液器取100~200 ul細胞放入1.5 mlEP管中,瓶蓋過火,擰緊,將培養瓶放回搖床;

3.將200 ul細胞混勻,取10 ul細胞加入10 ul臺盼藍,顯微鏡下計數。根據細胞數決定下游實驗;
4.細胞需計數兩次求平均值;
5.懸浮細胞生長參數;
6.根據不同細胞的生長曲線在合適的時間和密度給細胞接種傳代。
以上是細胞搖瓶在懸浮細胞傳代中的應用,這種耗材不止應用于懸浮細胞的培養,在液體菌種制備中同樣具備廣泛的應用,如雞腿菇、枯草芽孢桿菌、皺柄白馬鞍菌等,是一種經濟實惠的細胞培養工具。
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