我們在使用細胞工廠等細胞培養耗材培養細胞時要對細胞做常規性檢查。觀察細胞形態和生長情況以及培養的pH變化、有無污染等。根據細胞動態變化,做換液或傳代處理,如發現異常情況應及時采取措施。一般會從以下四個方面進行觀察:
1.細胞形態
細胞工廠內生長狀態良好的細胞,在一般顯微鏡下觀察時可見,細胞透明度大、折光性強、輪廓不清。細胞生長不良時,輪廓增強,胞質中常出現空泡、脂滴和其他顆粒狀物,細胞之間空隙加大,細胞形態可變得不規則甚至失去原有特點,如上皮細胞變成類上皮細胞等。

2. 細胞生長
初代培養或傳代的細胞懸液接種以后,經過長短不同的潛伏期后開始增殖。傳代細胞系、胚胎組織或幼體組織一般在第二天即可見細胞生長,一周內便可連接成片。接種細胞長滿細胞工廠后,應及時做再培養。否則由于營養物消耗和代謝積累,細胞即進入停止期或退化期。
3.營養液
正常情況下,培養液呈桃紅色。如果細胞維持在pH6.5~6.6條件下,細胞會脫落死亡。當細胞工廠內培養液酸化變黃時,說明培養液中代謝產物已堆積到一定量,需要更換新鮮培養液。培養液中如加Hepes或用5%CO2溫箱培養可使pH維持相對穩定。
4.微生物污染
微生物污染培養細胞培養物后會出現pH值改變,培養液呈現混濁狀。細菌感染后,由于細菌的運動,光鏡觀察細胞工廠內可見有微閃光;真菌感染則在鏡下見許多細絲狀菌絲,有時還密集有群集孢子;支原體的污染需要借助一些檢測手段才可檢出。
這就是富道細胞為大家分享的細胞工廠培養細胞時四個觀察方面,希望對大家有所幫助。
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